ลักษณะและคุณสมบัติของเซลล์ไลน์จากจระเข้

Establishment of a cell line derived from Siamese crocodile, Crocodylus siamensis

 

สมเกียรติ์  กาญจนาคาร                                                                                      Somkiat Kanchanakarn

อุมาลัย  สดวกดี                                                                                                           Umalai Saduakdee
 

สถาบันวิจัยสุขภาพสัตว์น้ำจืด                                     Inland Aquatic Animal Health Research Institute

 

บทคัดย่อ                

ทำการแยกและเลี้ยงเซลล์จากตัวอ่อนของจระเข้ระยะที่ยังอยู่ในไข่  พบว่าเซลล์เจริญได้ดีในอาหาร  Leibovitz-15  ที่มีซีรั่ม 10-15%  และสามารถทำ  subculture  ได้ 154 passage  อุณหภูมิที่เหมาะสมต่อการเจริญของเซลล์คือ  25o - 30o ซ  เซลล์นี้ได้ตั้งชื่อว่า  SCE (Siamese crocodile embryo)  เป็นเซลล์ชนิด  epithelium  ไม่พบการปนเปื้อนของเชื้อไวรัส  แบคทีเรีย  เชื้อรา  หรือไมโครพลาสมา  เซลล์ SCE  สามารถเก็บรักษาในสภาพแช่เยือกแข็งในถังไนโตรเจนเหลว (-190o ซ)  เซลล์  SCE  สามารถมีชีวิตอยู่และคงสภาพของ  monolayer  ได้นานกว่า 3 สัปดาห์ ที่อุณหภูมิ 27o ซ  โดยไม่ต้องเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์  เซลล์ SCE  ยอมรับการติดเชื้อไวรัสและเกิดมีการเปลี่ยนแปลง  cytopathic effect (CPE)  จากเชื้อไวรัสดังต่อไปนี้  เชื้อแรบโดไวรัสที่แยกได้จากปลาป่วยเป็นโรคระบาด  หรือ  EUS  เชื้ออิริโดไวรัสที่แยกได้จากกบและปลาบู่  และเชื้อ  channel catfish virus (CCV)  เซลล์  SCE  ถึงแม้ว่าจะพัฒนามาจากจระเข้  แต่สามารถที่จะนำมาใช้เพาะเชื้อไวรัสที่ก่อโรคในปลา และกบได้ดี

 

คำสำคัญ :  เซลล์ไลน์  จระเข้  อิริโดไวรัส  แรบโดไวรัส

 

Abstract

A new cell line derived from embryo of Siamese crocodile, Crocodylus siamensis, was established.  The crocodile cells grew well in tissue culture medium Leibovitz-15 supplemented with 10-15% fetal calf serum at 25-30°C.  They have been sub-cultured for 154 passages.  This new cell line is named as SCE or Siamese crocodile embryo.  SCE cells exhibited epithelial-like morphology.   The cells were free from adventitious viruses, bacteria, fungi and microplasmas.  SCE cells could be stored in liquid nitrogen tank.  The cells could reach monolayer within a few days after 1:3 sub-cultures and the monolayer still remained more than 3 weeks without changing the tissue culture medium at 27°C.  SCE cells supported the growth or propagation of many viruses such as snakehead rhabdovirus (SHRV), ulcerative disease rhabdovirus (UDRV), Rana tigrina ranavirus (RTRV), Oxelotris marmoratus ranavirus (OMRV) and channel catfish virus (CCV).   Although the SCE line is originated from reptile, it does useful for virus isolation examination in diseased fishes and amphibians.  

 

Keywords: Cell line, crocodile, Iridovirus, Rhabdovirus